对花授粉采集当天早晨刚开放的雄花，花瓣向上放在盘子里，将雄花对着刚开放的雌花，用雄花的雄蕊轻轻在雌花柱头上涂抹，每朵雄花可授7~8朵雌花。
蜜蜂授粉猕猴桃花没有蜜腺，对蜜蜂的吸引力不大，所以用蜜蜂授粉时所需的蜂量较大，每箱中要有不少于3万头活力旺盛的蜜蜂。当猕猴桃园中约有10%的雌花开放时，将蜂箱移入园内，过早会使蜜蜂习惯于园外其他蜜源植物，从而减少采集猕猴桃花粉的次数。为了增强蜜蜂的活力，每2天给每箱蜜蜂喂1升50%的糖水，蜂箱放置在园中向阳的地方。
散花授粉早晨6~8时收集当天开放的雄花花药，在9~11时用鸡毛或毛笔轻轻弹撒在雌花柱头上。
简易授粉器授粉将已采集的花粉用滑石粉等稀释5~10倍，装入塑料瓶中，在瓶盖上插通气管，然后将花粉吹向柱头。也可用小毛笔或铅笔橡皮头，蘸取花粉，轻轻涂在雌花的柱头上。
检查补授授过粉的雌花一般24小时后柱头颜色由乳白色变为淡黄色，而未授粉的花柱头是乳白色，需补授，连续进行2~3天即可结束。