食用菌栽培种由原种扩大而成，所有的原种培养基均可用于制备栽培种。栽培种培养料的制备与原种基本相同。
（1）配料的方法和步骤
棉籽皮一麸皮培养基（适用于木耳、金针菇、滑菇、平菇等栽培）：
棉籽皮44千克、麸皮5千克、蔗糖0．5千克、石膏粉0．5千克。
木屑一麸皮培养基(适用于银耳、黑木耳等栽培种):
木屑38千克、麸皮10千克、石膏粉0.5千克、蔗糖0.5千克、硫酸镁150克、黄豆粉850克，加水47.5－52.5千克。
棉籽皮-木屑培养基(适用于香菇栽培种):
棉籽皮20千克、木屑19千克、麸皮或米糠10千克、蔗糖0.5千克、石膏粉0．5千克、水30千克。pH6.5－7为宜。
以棉籽皮一木屑配制为例：首先称量棉籽皮20千克、木屑19千克、麸皮10千克、石膏粉0．5千克、蔗糖0.5千克，加入适量水搅拌均匀；培养料拌好后即可装入聚丙烯袋中，装料时将料的底角内插，上下松紧程度要一致，边装边压实，每袋可装干料300－375克，湿料700－850克。装好袋后，在培养料中间插一洞穴，深度离袋底1寸左右，袋口放一棉塞，扎紧袋口。装好袋后当天灭菌，以免培养料发霉变质。
灭菌：塑料袋栽培种灭菌时宜卧放，不要摆的过紧，要留有空隙，以便于蒸气流通。如果用高压灭菌，在每平方米13．1千克的压力下灭菌2．5小时。如用土蒸锅，温度达到100℃后再继续灭菌8－10小时。