非洲紫罗兰,又称大花非洲苦苣苔,属苣苔科非洲紫罗兰属植物,原产于非洲,后传入我国。由于花色鲜艳,有紫、粉红、青白和复色等,若管理得当可常年开花,深受群众喜爱。常规繁殖难以满足市场需求,组织培养法是快速繁殖的有效途径。
一、取材及灭菌。采用长势良好且无病虫害的优良植株叶片、叶柄及腋芽等为材料。将材料切下后,用自来水冲洗1~2小时,经滤纸吸干后,再用70%酒精浸泡30秒,然后用10%漂白粉的上清液在无菌条件下灭菌15~20分钟;或用0.1%的氯化汞常规灭菌7~12分钟后,用无菌水冲洗3~4次,经无菌滤纸再次吸干后,将叶片切成0.5×0.5厘米的小块,叶柄或腋芽则切成0.3~0.5厘米长的切段,分别接种在不同的培养基上。
二、培养过程。将灭菌后切好的叶片、叶柄及腋芽等分别接种在0.7%琼脂固化的MS培养基上,附加NAA0.1毫克/升、BA0.1毫克/升、葡萄糖或蔗糖3%,pH值调至5.8。置于25~30℃、光照强度1500~4000小时、每日光照14小时的培养室中培养1个月后,可见叶片、叶柄及腋芽外殖体膨大,进而形成大量的愈伤组织和芽丛,每块外殖体平均可产生30~40个不定芽。不定芽和愈伤组织经分割后可在上述培养基上反复培养繁殖。小芽长大后,将其转入MS附加NAA0.1毫克/升、BA0.1毫克/升的培养基上,小芽可进一步发育长大,并形成小苗。当小苗长高后,将其切下转入不含激素的MS基本培养基中或附加NAA0.1毫克/升的培养基上诱导生根,再经1~2个月培养便可形成正常的再生植株。当试管苗高至2~3厘米、具3~5片叶片、根系发育良好时,将其转入驯化室中,在20℃左右,适当降低空气湿度的条件下培养1~2周,移栽前2天打开瓶盖,加少量水以软化琼脂。移栽后注意保温保湿,大部分试管苗可以成活,移栽土以腐殖质加蛭石为好。待其长大后即可开花结果。